X-gal, également connu sous le nom de 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-bêta-D-galactopyranoside, est un substrat synthétique utilisé en biologie moléculaire pour détecter l'activité de l'enzyme bêta-galactosidase. Cette enzyme clive le substrat X-gal en produisant un produit qui est visible sous forme de coloration bleue.
Le X-gal est particulièrement utilisé dans le cadre de l'analyse génétique des bactéries E. coli. Lorsqu'il est ajouté à un milieu de culture contenant une souche d'E. coli recombinante possédant un gène rapporteur lacZ, qui code pour la bêta-galactosidase, le X-gal est transformé en une molécule bleue par l'enzyme. Cela permet aux chercheurs de détecter rapidement et facilement les bactéries qui ont subi une transformation génétique réussie.
La coloration bleue produite par la réaction entre le X-gal et la bêta-galactosidase est souvent utilisée pour identifier les colonies bactériennes recombinantes lors d'une expérience de clonage ou de criblage génétique. Les bactéries qui n'ont pas subi de transformation génétique restent blanches, car elles ne produisent pas d'enzyme bêta-galactosidase.
En plus de son utilisation dans les études bactériennes, le X-gal peut également être utilisé dans des expériences impliquant des cellules eucaryotes, notamment pour étudier l'expression des gènes dans des organismes modèles tels que la souris.
En résumé, le X-gal est un substrat couramment utilisé en biologie moléculaire pour détecter l'activité de l'enzyme bêta-galactosidase. Son utilisation permet une détection rapide des bactéries recombinantes et est largement utilisée dans les études génétiques.
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