Qu'est-ce que didésoxyribonucléotide ?

Les didésoxyribonucléotides, également appelés ddNTPs, sont des molécules utilisées dans la technique de séquençage de l'ADN connue sous le nom de méthode de Sanger. Les didésoxyribonucléotides sont des analogues des désoxyribonucléotides, les éléments constitutifs de l'ADN, à l'exception d'une différence clé : un groupe hydroxyle (-OH) est remplacé par un groupe H sur le carbone 3' de la désoxyribose.

Lors de la réplication de l'ADN, les enzymes responsables du processus d'addition des nucléotides vont généralement utiliser des désoxyribonucléotides pour allonger la chaîne d'ADN nouvellement synthétisée. Cependant, lorsque des didésoxyribonucléotides sont incorporés dans la chaîne d'ADN en croissance, ils arrêtent la synthèse de la chaîne car leur groupe H à la place du groupe hydroxyle empêche la formation de nouvelles liaisons phosphodiester.

Dans la méthode de Sanger, les didésoxyribonucléotides marqués avec différentes étiquettes fluorescentes sont utilisés dans la réplication d'ADN, en plus des désoxyribonucléotides normaux. L'ADN est séparé par taille par électrophorèse, et la séquence est déterminée en fonction de la position des bases terminales marquées par fluorescence.

L'utilisation des didésoxyribonucléotides dans la méthode de Sanger a révolutionné le domaine de la génétique et de la biologie moléculaire en permettant un séquençage précis et efficace de l'ADN. Cette technique a été largement utilisée pour séquencer le génome humain et d'autres organismes, ainsi que pour étudier les mutations génétiques et les variations génétiques.

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